在對老化感到不安、並在海量美容資訊中感到迷惘的現代,真正被需要的並非一時的應對,而是對未來美麗的確切可能性。Eternam株式會社(總公司:東京都澀谷區,代表取締役:松本隆明)與化妝品原料製造商Technoble株式會社(總公司:大阪府,代表取締役社長:澤木茂豐)的共同研究中,確認了人類臍帶間葉幹細胞培養上清液可能對被認為是肌膚老化因素之一的發炎反應及色素沉澱過程產生作用。 本研究成果已於2026年6月11日(四)~6月14日(日)舉辦的第125回日本皮膚科學會總會,以及2026年6月26日(五)~6月28日(日)舉辦的第26回日本抗老化醫學會總會上發表。 演題名:『人類臍帶間葉幹細胞培養上清液的皮膚科學功能探討3』 編號:P1-17 (日本皮膚科學會版) 演題名:『人類臍帶間葉幹細胞培養上清液的皮膚科學功能探討3』 編號:P13-1 (抗老化醫學會版) 研究背景・目的 近年備受矚目的人類幹細胞培養上清液,因含有細胞來源的細胞激素及外泌體,對肌膚的高度功能性備受期待,因此正進行皮膚科學功能性的探討。 本公司集團在探討人類臍帶來源間葉幹細胞(UCMSCs)的有效培養方法後,成功開發出比其他來源幹細胞培養上清液含有更多細胞激素的人類臍帶間葉幹細胞培養上清液,並對其皮膚科學功能進行研究,現報告所獲得的新知見。 研究內容・結果 〇關於人類臍帶間葉幹細胞培養上清液的抗發炎效果 抑制前列腺素E2(發炎物質)的產生 將人類表皮細胞添加樣品(人類臍帶間葉幹細胞培養上清液)後,再培養1天。接著,從培養器底部照射UV-B,並繼續培養。回收培養1天後之上清,並依照Prostaglandin E2 ELISA Kit-Monoclona的協議書測定前列腺素E2。 使用6.25%、12.5%的人類臍帶間葉幹細胞培養上清液,可顯著抑制前列腺素E2的產生。 抑制NLRP3發炎體形成 將人類表皮細胞添加樣品(人類臍帶間葉幹細胞培養上清液)後,培養1天。接著,從培養器底部照射UV-B,並繼續培養4小時。針對該細胞,使用FAM-FLICA Caspase-1 Assay評估發炎體形成所致的Caspase-1活性。之後,以Hoechst33342進行DNA染色,測定螢光強度(Ex=355nm、Em=460nm),透過將FLICA的螢光強度除以DNA的螢光強度,求得每單位DNA的Caspase-1活性(發炎體形成)。 使用3.13%~25%的上清液,可顯著抑制NLRP3發炎體的活性。 此外,透過實際的螢光觀察影像,也確認了顯著抑制Caspase-1活性。 抑制表皮細胞膜過氧化 將人類表皮細胞添加樣品(人類臍帶間葉幹細胞培養液)後培養2天,置換為HBSS後照射UV-B。將LiperFluo溶解於HBSS至1μM,染色30分鐘。以HBSS清洗2次後,使用螢光盤式讀取儀計測螢光強度並繪製圖表。 使用25%的人類臍帶間葉幹細胞培養液,可顯著抑制表皮細胞膜的過氧化。 抑制人類嗜鹼性球脫顆粒 將以緩衝液調整的各濃度樣品溶液(人類臍帶間葉幹細胞培養上清液)添加至人類嗜鹼性球。接著添加含有compound 48/80的緩衝液,誘導脫顆粒。誘導1小時後,回收上清,使用鄰苯二甲醛進行組織胺的螢光測定。另一方面,針對細胞則以MTT還原法測定呼吸活性,評估細胞的生存率。 細胞的呼吸活性(生存率)在使用25%的人類臍帶間葉幹細胞培養液時顯著上升。 組織胺的釋放量以濃度依存方式發揮抑制人類嗜鹼性球脫顆粒的效果,3.13%以上的濃度顯著抑制。 〇關於人類臍帶間葉幹細胞培養上清液的抗色素沉澱效果 抑制黑色素體成熟、運輸相關蛋白質的生成 將人類黑色素細胞添加樣品(人類臍帶間葉幹細胞培養液)後,再培養24小時。之後使用ISOGENII試藥溶解並回收。依常規方法回收totalRNA,並透過反轉錄反應合成cDNA。將合成的cDNA作為樣本,進行qPCR,檢測各種基因的表現以及內部標準ACTB基因的表現。 確認人類臍帶間葉幹細胞培養液以濃度依存方式抑制人類黑色素細胞黑色素體中與成熟・運輸相關蛋白質PMEL、RAB32、RAB38、ANKR27的表現,12.5%以上濃度確認有顯著減少。 這些結果暗示了可能抑制了黑色素體的傳遞。 引用自石田等人,黑色素體的形成・成熟・運輸機制 顯微鏡Vol.48,No.1(2013) 觀察黑色素體運輸抑制(表皮細胞-黑色素細胞共培養觀察) 將人類黑色素細胞與人類表皮細胞的共培養系統添加樣品(人類臍帶間葉幹細胞培養上清液)後,培養72小時。之後以PBS(-)清洗1次,再以15%中性福馬林液浸漬30分鐘進行固定處理。清洗後,添加純水,再添加Fontana-Masson銀溶液,於60°C反應2小時後進行顯微鏡觀察。 觀察到覆蓋培養器底部的表皮細胞及其上方深染的黑色素細胞。在表皮細胞中